【中文摘要】 免疫捕捉PCR技术(Immunocaptured PCR ,ic-PCR)是利用免疫捕捉法对传染病病原的高效富集,结合PCR技术特异扩增,是理想的快速诊断方法之一。本文探讨ic-PCR法在四种严重传染病病原:霍乱弧菌(VC)、大肠埃希氏菌O157(E.coli O157)、SARS冠状病毒和流感病毒(AIV)检测中的应用。 1.三种免疫捕捉法:微孔板(Microwell)、200ulPCR管(microtube)和免疫磁珠(IMS),均可从环境样品和人体样品中特异捕捉霍乱弧菌(VC)、大肠埃希氏菌O157(E.coli O157)、SARS冠状病毒和流感病毒(AIV),较传统的分离培养方法可节省大量时间。免疫磁珠(IMS)法因可处理的样品量大,反应动力学特性更佳,是最合适的免疫捕捉方法。 2.细菌的检测:在O1、O139群霍乱弧菌的群特异性抗原基因(rfb)和肠毒素基因(ctx)上,设计3对引物进行多重PCR,一次PCR反应即可检测出霍乱弧菌,区分血清群别及是否为流行毒株。PCR扩增序列与预计序列完全一致,检测限低于100cfu/ml;根据大肠埃希氏菌O157(E.coli O157...

【英文摘要】 Immunocaptured PCR (ic-PCR) technique, combining the enrichment character of immunocaptured method to infectious microbe and specific amplification feature of PCR technique, is one of the most ideal specific and quick diagnostic methods. In this study, ic-PCR was used to detect the following four severe infectious microbes: Vibrio cholerae, Escherichia coli O157, SARS-Cov and AIV. 1. All the three immunocaptured methods: microwell, microtube and IMS (Immunomagnetic sphere), can specifically capture...