【中文摘要】 目的：构建小干扰RNA(siRNA)表达质粒，观察质粒介导的RNA干扰技术能否有效的抑制A549细胞的增殖。 方法：针对表皮生长因子受体(EGFR)基因设计构建4个可表达特异性siRNA的重组质粒，利用核酸转染试剂Lipofectamine~(TM)2000脂质体转染到非小细胞肺癌细胞系A549细胞中。瞬时转染分7组(pSilencer-1组、pSilencer-2组、pSilencer-3组、pSilencer-4组、p53-pcDNA、脂质体组及空白对照组)，采用四甲基偶氮唑盐比色试验(MTT法)测定吸光度(A值)以观察转染后1、3、5、7日该细胞增殖的活力，并计算各组增殖抑制率。稳定转染则利用潮霉素对转染后的细胞进行加压筛选，得到可以稳定表达该重组质粒的A549细胞，通过流式细胞仪测定细胞周期分布情况，比较各组G0／G1期细胞百分比。 结果：1．成功构建EGFR基因的siRNA表达质粒，并通过琼脂糖凝胶电泳以及基因测序证实序列的正确。2．pSilencer-1、pSilencer-2、pSilencer-3、pSilencer-4瞬时转染A549细胞后均能引起细胞增殖活力...

【英文摘要】 Objective: Constructing plasmids vector expressing small interfering RNA (siRNA) to investigate whether the vector-based RNA interference technology inhibit the proliferation of the non-small cell lung cancer cell line A549. Methods: 4 plasmids expressing specific siRNA targeting epidermal growth factor receptor (EGFR) gene were constructed to transfect the A549 cells mediated by liposome Lipofectamine~(?)2000. 7 groups were divided for transient transfection (pSilencer-1、pSilencer-2、 pSilencer-3、 pSilencer...