【中文摘要】 褐藻胶是由β-D-甘露糖醛(Mannuronate)和α-L-古罗糖醛酸(Guluronate)两种糖单元连续或交替连接而成的线性多糖分子。褐藻胶的用途非常广泛,结构不同的褐藻胶及其衍生物具有不同的生物活性,富含M的褐藻胶具有抗肿瘤、免疫调节剂等作用;而富含G的褐藻胶具有抗艾滋病等重要药用价值。因此,褐藻胶的生物合成以及降解、修饰等褐藻胶的生物转化已经成为该领域的研究热点。本论文以海洋Pseudomonas sp. QDA为研究对象,利用DNA重组技术对其褐藻胶裂解酶基因algL与甘露糖醛酸C-5差向异构酶基因algG进行了研究。 Pseudomonas sp. QDA中褐藻胶裂解酶基因algL过量表达菌株的建立。首先,构建了过量表达载体pMF36-Ka-algL以及对照质粒pMF36-Ka,运用电击转化方法分别转入Pseudomonas sp. QDA。通过卡那霉素抗性筛选以及PCR、酶切鉴定方法得到阳性克隆。胞外褐藻胶含量测定显示,褐藻胶裂解酶AlgL的过量表达对胞外褐藻胶产量没有明显影响,但在PAGE中显示,裂解酶的过量表达使胞外褐藻胶分子量大幅度降低,形成一系列寡糖。这为褐藻胶寡糖的... 【英文摘要】 Alginate is a polymer ofα-L-guluronate(G) andβ-D-mannuronate(M), which are linked together to form polymannuronate, polyguluronate, or alternating M&G blocks in the linear molecular. Alginates and derivatives have been widely used in pharmaceutical and food industries. The ratio of M/G is an important factor on the efficiency of the alginate bioactivity. Alginates with high M contents exhibit high activity on anti-tumor and stimulate murine haematopoiesis, while alginates with high G content show anti-...
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